1. 如何妥善贮存和冷冻血清以确保产质量量不受损?在将血清从冷冻箱取出后,应先放置于2~8℃的冰箱中进行初步解冻,然后在室温下彻底解冻。在此过程中,务必保持均匀摇晃,避免沉淀的形成。若在2-8℃条件下储存过久,血清中的蛋白质和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能会聚集,导致沉积或混浊。因此,推荐将血清存放在-20℃以下,并避免反复冻融。我们强烈建议将血清保存于-20℃,如果选择在4℃保存,切忌超过一个月。如一次无法用完整瓶血清,建议进行无菌分装至适宜的灭菌容器,并放回冷冻室。
2. 血清中出现的絮状沉积物是什么?应如何处理?这些沉积物主要由纤维蛋白和脂蛋白组成,这是正常现象,不会影响产品的性质。处理方法为对血清进行离心(400g,1-2分钟),或者轻轻让其沉淀到瓶底,再小心将上层血清转移至另一个无菌瓶中。一般不推荐使用过滤方法去除沉积,因为沉积可能会堵塞滤膜。在多数情况下,轻轻摇晃沉积并加热至37℃,沉积将自然溶解。因此,在使用产品时,请确保摇晃并加热血清至37℃,这样沉积物会自行消失。
3. 如何在实验室选择适合的血清?在国内普遍认为HYCLONE品牌的血清质量较好,但根据我在北美的经验,国外通常认为GIBCO的血清质量更优。需要注意的是,价格并不一定决定质量。这两种品牌的血清通常价格偏高,对于不太娇气的细胞,国产血清完全可以满足需求。此外,由于国内的HYCLONE和GIBCO并无生产线,我们只能从代理商处购买,而这一市场中鱼龙混杂,购买到假货的风险很大。因此,我更倾向于直接从可信赖的直销员处购得血清。有些外国生物公司近期刚进入中国市场,知名度较低,但在国外已有良好声誉,如Wisent等,他们在国内设有办事处,所提供的血清质量与HYCLONE相当,但价格却相对更为优惠。
4. 如何防止血清中产生沉积?为了避免沉积的形成,可采取以下措施:
(1) 在冷冻血清时,应不断摇晃以保持成分均匀,减少沉积发生的可能性。
(2) 在进行血清分装冻存时,应均匀摇晃以避免气泡,确保温度与成分一致。
(3) 不要将血清从-20℃直接加热至37℃,温度变化过大可能会导致空气中的蛋白质凝结形成沉积。
(4) 避免将血清长时间置于37℃,以防变得混浊,且不稳定成分会因受热而受到破坏,影响血清质量。
(5) 热灭活过程容易增加沉积物的产生,非必要情况下可省略。
(6) 若必须进行热灭活,应遵循56℃,持续30分钟的标准,且期间要均匀摇晃,以免高温、长时间或摇晃不均造成沉积物的增加。
5. 小牛血清与胎牛血清之间的区别及注意事项是什么?
来源不同:胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)是通过对屠宰怀孕母牛的心脏进行穿刺采血获取的,而新生牛(小牛)血清(Calf Serum, CS)则来源于出生后10至14天的小牛。
成分及比例不同:二者所含的促细胞生长因子、促附着因子、激素及其它活性物质含量和比例不同,因而用途也有所区别。某些细胞生长需要胎牛血清,而有些细胞则只需小牛血清即可。使用浓度一般为5%-10%,特殊要求时可达到20%。
血清的保存与使用需注意:应将血清保存于-5℃至-20℃,在4℃条件下的保存不得超过一个月。冻存时应将血清先放置于2-8℃冰箱,并定期摇匀以加速溶解,随后再升至室温。不应直接将冷冻血清放入37℃水浴或温箱中。若存放于37℃,血清的颜色及粘稠度可能会增加,而且在冷冻和热灭活后,应按用量分装并存放于-20℃,以避免反复冻融。如有需求,欢迎随时与我们联系,选择尊龙凯时,让您的实验更加专业和优质!